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智立中特(武漢)生物科技有限公司

質(zhì)粒設(shè)計(jì)、質(zhì)粒構(gòu)建服務(wù),并提供進(jìn)口微生物菌種、細(xì)胞資源,與國(guó)內(nèi)外多家研制單位,生物醫(yī)藥,第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu),科研院所有著…

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HCT-8/Taxol人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株

產(chǎn)品價(jià)格面議

產(chǎn)品品牌智立中特生物

最小起訂≥1 瓶

供貨總量1000 瓶

發(fā)貨期限自買家付款之日起 15 天內(nèi)發(fā)貨

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更新日期2023-08-08 10:31

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智立中特(武漢)生物科技有限公司

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智立中特(武漢)生物科技有限公司

聯(lián) 系  人:肖素素(女士) 經(jīng)理 

聯(lián)系手機(jī):18907133396

聯(lián)系固話:400-009-7996

聯(lián)系地址:湖北省武漢市東湖高新開(kāi)發(fā)區(qū)軟件新城健康智谷D2棟5樓

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商品信息

基本參數(shù)

品牌:

智立中特生物

所在地:

湖北 武漢市

起訂:

≥1 瓶

供貨總量:

1000 瓶

有效期至:

長(zhǎng)期有效

產(chǎn)品規(guī)格:

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
詳細(xì)說(shuō)明
HCT-8/Taxol人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株細(xì)胞特性

1)來(lái)源:人結(jié)腸癌

2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣

3)含量:>1x10e6個(gè)/mL

4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:(1)干冰運(yùn)輸,收到后立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長(zhǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

細(xì)胞用途:僅供科研使用。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

注意:客戶收到細(xì)胞后按照下面的要求操作:培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)液是不含藥物的。待細(xì)胞長(zhǎng)到70-80%的匯合度時(shí),去掉培養(yǎng)液,加入含500ng/ml Taxol藥物的培養(yǎng)液,放入培養(yǎng)箱,這段時(shí)間肯定會(huì)有小部分細(xì)胞懸浮起來(lái),但是不要緊,通過(guò)換液可以去掉,下面的細(xì)胞待長(zhǎng)滿就可以消化傳瓶了,這時(shí)可以一直用含藥培養(yǎng)液來(lái)消化培養(yǎng)細(xì)胞,一兩代之后可以將藥物濃度提高到1000ng/ml,含藥培養(yǎng)液用于細(xì)胞培養(yǎng)都沒(méi)問(wèn)題的,凍存的時(shí)候就不要在凍存液里面加藥物了。

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(添加NaHCO3 1.5g/L,D-葡萄糖2.5g/L,丙酮酸鈉0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,添加PS,1%,Taxol000ng/ml。

2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

智立中特(武漢)生物科技有限公司主要致力于質(zhì)粒微生物資源的保護(hù)、共享和持續(xù)利用,圍繞我國(guó)生命科學(xué)研究、生物技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展等重大需求,探索、發(fā)現(xiàn)、收集國(guó)內(nèi)外的微生物資源,妥善長(zhǎng)期保存管理;在保證生物安全和保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的前提下,為工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護(hù)、科研教育提供質(zhì)粒載體物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術(shù)服務(wù)。旗下質(zhì)粒載體網(wǎng)是一款提供質(zhì)粒載體展示及定制的專業(yè)型網(wǎng)站,由智立中特(武漢)生物科技有限公司聯(lián)合多家企業(yè)公司科研院校共同打造!主要展示了各種基因類型下的質(zhì)粒載體!

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