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智立中特(武漢)生物科技有限公司

質(zhì)粒設(shè)計(jì)、質(zhì)粒構(gòu)建服務(wù),并提供進(jìn)口微生物菌種、細(xì)胞資源,與國(guó)內(nèi)外多家研制單位,生物醫(yī)藥,第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu),科研院所有著…

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Bel/Fu人肝癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株

產(chǎn)品價(jià)格面議

產(chǎn)品品牌智立中特生物

最小起訂≥1 瓶

供貨總量1000 瓶

發(fā)貨期限自買(mǎi)家付款之日起 15 天內(nèi)發(fā)貨

瀏覽次數(shù)82

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更新日期2023-08-08 10:31

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智立中特(武漢)生物科技有限公司

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智立中特(武漢)生物科技有限公司

聯(lián) 系  人:肖素素(女士) 經(jīng)理 

聯(lián)系手機(jī):18907133396

聯(lián)系固話(huà):400-009-7996

聯(lián)系地址:湖北省武漢市東湖高新開(kāi)發(fā)區(qū)軟件新城健康智谷D2棟5樓

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商品信息

基本參數(shù)

品牌:

智立中特生物

所在地:

湖北 武漢市

起訂:

≥1 瓶

供貨總量:

1000 瓶

有效期至:

長(zhǎng)期有效

產(chǎn)品規(guī)格:

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
詳細(xì)說(shuō)明
  Bel/Fu人肝癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株

平臺(tái)編號(hào):zl-057120

規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

種屬:人源細(xì)胞系/食管、胃、腸、肝、膽

價(jià)格:詢(xún)價(jià)

到貨周期:10-15個(gè)工作日

詳情描述

細(xì)胞介紹

該細(xì)胞為氟尿嘧啶處理的人肝癌耐藥細(xì)胞株。

細(xì)胞特性

1)來(lái)源:肝癌細(xì)胞

2)形態(tài):上皮細(xì)胞樣

3)含量:>1x106個(gè)/mL

4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

5)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

運(yùn)輸和保存:使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺(tái)棄去上清,加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

細(xì)胞用途:僅供科研使用。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

注意:客戶(hù)收到細(xì)胞后按照下面的要求操作:培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)液是不含藥物的。待細(xì)胞長(zhǎng)到70-80%的匯合度時(shí),去掉培養(yǎng)液,加入含8000ng/ml FU藥物的培養(yǎng)液,放入培養(yǎng)箱,這段時(shí)間肯定會(huì)有小部分細(xì)胞懸浮起來(lái),但是不要緊,通過(guò)換液可以去掉,下面的細(xì)胞待長(zhǎng)滿(mǎn)就可以消化傳瓶了,這時(shí)可以一直用含藥培養(yǎng)液來(lái)消化培養(yǎng)細(xì)胞,一兩代之后可以將藥物濃度提高15000ng/ml,含藥培養(yǎng)液用于細(xì)胞培養(yǎng)都沒(méi)問(wèn)題的,凍存的時(shí)候就不要在凍存液里面加藥物了。

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022,添加NaHCO3 1.5g/L,D-葡萄糖2.5g/L,丙酮酸鈉0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,添加1%雙抗,20000ng/ml氟尿嘧啶。

2)培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

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