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智立中特(武漢)生物科技有限公司

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智立載體網SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞

產品價格面議

產品品牌智立中特生物

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供貨總量1000 瓶

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更新日期2023-09-13 10:02

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商品信息

基本參數

品牌:

智立中特生物

所在地:

湖北 武漢市

起訂:

≥1 瓶

供貨總量:

1000 瓶

有效期至:

長期有效

產品規格:

1×10?cells/T25培養瓶
詳細說明
  產品信息

名稱PUMC-HUVEC-T1(SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞)

種屬人

生長特性貼壁

細胞形態上皮細胞樣

背景描述PUMC-HUVEC-T1形態呈現為典型的鵝卵石樣排列,已證明在體外可傳至40代。PUMC-HUVEC-T1內皮標記vWF、CD31、CD34均陽性,可結合凝集素,電鏡下可見緊密連接和W-P小體,Matrigle上可形成管型。不同代數的HUVEC-T1細胞核型正常穩定(P12、P13、P19、P38),裸鼠體內接種不成瘤(P9和P33)。

生長培養基DMEM+0.01mg/mL Insulin+1%NEAA+10%FBS(164210)+1%P/S

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件凍存液:55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮

培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。

3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養液后吹勻。

4.收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按1:2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中,建議凍存一支備用,后續傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。

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