產品信息

名稱PUMC-HUVEC-T1（SV40T轉化人臍靜脈內皮細胞）

種屬人

生長特性貼壁

細胞形態上皮細胞樣

背景描述PUMC-HUVEC-T1形態呈現為典型的鵝卵石樣排列，已證明在體外可傳至40代。PUMC-HUVEC-T1內皮標記vWF、CD31、CD34均陽性，可結合凝集素，電鏡下可見緊密連接和W-P小體，Matrigle上可形成管型。不同代數的HUVEC-T1細胞核型正常穩定（P12、P13、P19、P38），裸鼠體內接種不成瘤（P9和P33）。

生長培養基DMEM＋0.01mg/mL Insulin＋1%NEAA+10%FBS(164210)＋1%P/S

推薦換液頻率2~3次/周

凍存條件凍存液：55%基礎培養基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮

培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。

3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養液后吹勻。

4.收到細胞后首次傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。

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